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Expression und Funktion der ACE-2/Angiotensin(1-7)/Mas1-Achse in Osteosarkomzelllinien U2-OS und MNNG-HOS
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Published: | October 2, 2012 |
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Fragestellung: Das Renin-Angiotensin-System (RAS) ist über seine klassische Angiotensin converting enzyme (ACE)/Angiotensin II/Angiotensin II Typ 1 Rezeptor (AT1R)-Achse mit Wachstum und Metastasierung der meisten soliden Tumoren assoziiert. AT1R-Rezeptorblocker reduzieren die Tumorgröße und verminderten Metastasen in Lunge und Leber im murinen Osteosarkom-Modell. Zur Expression und Funktion der alternativen ACE-2/Ang(1-7)/Mas1-Achse im Osteosarkom liegen bislang keine Ergebnisse vor. Diese Studie dient der molekularen Charakterisierung dieser alternativen Achse und der Aufklärung der Rolle des Mas1-Rezeptors für Proliferation und Migration der Sarkomzelllinien U2-OS und MNNG-HOS.
Methodik: Die Expression der Ang(1-7)-bildenden Enzyme ACE2, neutrale Endopeptidase 24.11 (NEP) und Prolylendopeptidase (PEP) sowie des Rezeptors für Ang(1-7), Mas1 wurde mittels quantitativer RT-PCR unter basalen Bedingungen sowie unter Einfluss von IL-1-beta bestimmt. Mas1-Protein-Mengen wurden mittels Immunblot quantifiziert. Die Konsequenzen der siRNA-basierten Verminderung der Mas1-Expression sowie der IL-1-beta-abhängigen Induktion von Mas1 auf die Proliferation und Migration von U2-OS und MNNG-HOS erfolgte mittels CyQuant NF Cell Proliferation Assay (Invitrogen) bzw. Cell migration 24well assay (ams Biotechnology).
Ergebnisse und Schlussfolgerungen: Beide Sarkomzelllinien exprimieren alle Komponenten der alternativen ACE-2/Ang(1-7)/Mas1-Achse. IL-1-beta bewirkt eine Verstärkung der Mas1-Expression, wobei die Beteiligung von NF-kappaB wahrscheinlich gemacht wurde. Die IL-1-beta-abhängige Induktion der Mas1-Expression bewirkte die Hemmung der Proliferation und Migration beider Sarkomzelllinien. Entsprechend führte die siRNA-mediierte Reduktion der Mas1-Expression zu einer Steigerung der Proliferation.
Es wurde erstmalig die Existenz und Funktionalität der alternativen ACE-2/Ang(1-7)/Mas1-Achse in Osteosarkomzelllinien U2-OS- und MNNG/HOS-Zellen nachgewiesen. Konditionen, die zu einer Hemmung der klassischen RAS-Achse und zur Stärkung der Mas1-Achse führen, könnten auch beim Osteosarkom Wachstum und Metastasierung vermindern. Diese Effekte könnten direkt über Mas1-Agonisten, aber auch indirekt über ACE-Inhibitoren/AT1R-Blocker erzielt werden.